
銷售熱線:
全國統一電話:
聯系我們
郵箱留言
kechengyiqi@163.com
銷售熱線
Tel:0731-55881818
地址
湖南省長沙市望城區普瑞西路858號金榮中德企業公園C2棟602號
發布時間:2019-04-24 閱讀1666次
離心機是生物學教學及科研領域中的常見儀器,離心技術也是分離、制備、純化生物樣品的重要手段。下面小編給大家介紹一下實驗室常用離心法之差速離心法:
一、原理
差速離心是根據顆粒大小和密度不同造成沉降速度(即沉降系數)的差異,通過分級提高離心轉速或高速與低速離心交替進行,使具有不同質量的顆粒樣品(或大分子)從混合液中分批沉降至管底,從而實現分離目的。
二、適用條件
該方法適用于混合樣品中各沉降系數差別較大的組分之間的分離,更準確地說是沉降系數差別在1至幾個數量級的混合樣品的分離,差別越大,分離效果越好。
三、使用方法
差速離心法一般采用固定角轉子,通過較低速度的離心沉淀,最重的顆粒將全部沉到管底。繼續將上清液以更高的轉速沉淀,即可得到次重的顆粒樣品。逐步增加離心轉速,即可分別得到不同重量的樣品顆粒,以達到分離的目的。
通常為了得到較純的顆粒樣品,還需要將沉淀重懸,用相同的轉速再次沉淀。重復幾次之后即可得到大小基本均一的顆粒。
但是一般在實際使用中,差速離心通常不用于精細分離,僅用于s值相差1個數量級及以上的2種顆粒的分離,且沉淀不能實現完全回收。
四、應用范圍
差速離心技術的應用十分普遍,尤其是針對有生物活性物質的分離、粗提和濃縮,例如:
動植物病毒
各種亞細胞組分(細胞核、葉綠體、線粒體等)
核酸
蛋白質,等
五、應用實例
馬鈴薯線粒體的制備
取馬鈴薯塊莖200克,加入2.5倍體積的勻漿緩沖液,勻漿后用4層紗布過濾。濾液經4000rpm離心10分鐘 ,收集上清液。
上清液13800×g(相對離心力RCF,即重力加速度g的倍數)離心15分鐘收集沉淀,用緩沖液重懸并加入終濃度為15mmol/L的氯化鎂。
經DNase I處理后,加入2倍體積的緩沖液,13800×g離心15分鐘收集沉淀,即為線粒體。
可成實驗室離心機型號H3-20K就能滿足一般實驗室實驗的需求。
版權所有:湖南可成儀器設備有限公司(因為專業所以做的更好-因為用心所以走的更遠)
聯系地址:湖南省長沙市望城區普瑞西路858號金榮中德企業公園C2棟602號 聯系電話:0731 5588 1818
Copyright 2019Comporation,All Rights Reserved 湘ICP備16004042號 營業執照
